ICH指導(dǎo)原則

國(guó)際人用藥品技術(shù)要求協(xié)調(diào)委員會(huì)( ICH ) 將監(jiān)管機(jī)構(gòu)和制藥行業(yè)聚集在一起討論藥品開(kāi)發(fā)，注冊(cè)科學(xué)和技術(shù)，旨在簡(jiǎn)化流程與組織結(jié)構(gòu)，以加速醫(yī)藥開(kāi)發(fā)管制流程，縮短病患采用新醫(yī)藥所需要的時(shí)間。2017年ICH會(huì)議通過(guò)了中國(guó)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局的申請(qǐng)，總局成為國(guó)際人用藥品注冊(cè)技術(shù)協(xié)調(diào)會(huì)正式成員。目前，ICH指導(dǎo)原則已成為國(guó)際通用的指導(dǎo)原則。

ICH指導(dǎo)原則分為四類，Q：質(zhì)量指導(dǎo)原則；S : 安全性指導(dǎo)原則；E : 有效性指導(dǎo)原則；M : 多學(xué)科指導(dǎo)原則，其中章節(jié)對(duì)細(xì)胞庫(kù)的質(zhì)量有如下規(guī)定：

一、細(xì)胞基質(zhì)的來(lái)源、歷史和產(chǎn)生

為確保制品的質(zhì)量和安全性，需提供一份支持性文件，記載生產(chǎn)生物技術(shù)產(chǎn)品及生物制品的細(xì)胞基質(zhì)的歷史，還應(yīng)記載它們母細(xì)胞系的歷史，以便將細(xì)胞基質(zhì)在研究和開(kāi)發(fā)階段所發(fā)生的事件與生產(chǎn)制品所用的特定細(xì)胞基質(zhì)相聯(lián)系來(lái)全面評(píng)估其風(fēng)險(xiǎn)。

1、細(xì)胞的起源、來(lái)源和歷史

應(yīng)說(shuō)明所用細(xì)胞基質(zhì)的細(xì)胞來(lái)源(實(shí)驗(yàn)室制備或來(lái)源于菌種庫(kù))，引證科學(xué)文獻(xiàn)上的相關(guān)參考資料。直接從實(shí)驗(yàn)室獲得的資料是shou選的，如果沒(méi)有這些資料，也可以利用文獻(xiàn)。

對(duì)于動(dòng)物來(lái)源細(xì)胞系，應(yīng)提供物種、品系、飼養(yǎng)條件、組織或器官的起源、地理位置、年齡和性別、致病因子的檢查結(jié)果以及原供體的一般生理狀況。

應(yīng)記錄細(xì)胞的培養(yǎng)歷史，包括最初分離細(xì)胞的方法、細(xì)胞體外培養(yǎng)的方法以及建立細(xì)胞系的方法(例如，任何物理、化學(xué)或生物學(xué)的方法，或附加的核苷酸序列)。還應(yīng)提供所有對(duì)基因操作和篩選的描述、細(xì)胞內(nèi)源性和外源性因子的鑒別、特性和檢測(cè)結(jié)果等資料。

關(guān)于細(xì)胞基質(zhì)的產(chǎn)生，應(yīng)提供詳細(xì)的制備過(guò)程中接觸的外源因子。應(yīng)提供培養(yǎng)基的組分，特別是提供關(guān)于人或動(dòng)物來(lái)源的物質(zhì)，如血清、酶、水解產(chǎn)物或其他活細(xì)胞方面的資料。提供的資料還應(yīng)包括來(lái)源、制備和質(zhì)控方法、檢測(cè)結(jié)果和質(zhì)量保證。還應(yīng)提供有關(guān)上述方面的文獻(xiàn)。這些資料將用于分析外源因子來(lái)源的可能途徑，并作為制品風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的一部分。

二、細(xì)胞庫(kù)

用連續(xù)傳代培養(yǎng)的細(xì)胞生產(chǎn)生物技術(shù)產(chǎn)品及生物制品的最da優(yōu)點(diǎn)是每批產(chǎn)品都有一個(gè)經(jīng)檢定過(guò)的共同起源。二級(jí)細(xì)胞庫(kù)即主細(xì)胞庫(kù)（MCB）和工作細(xì)胞庫(kù)(WCB)。WCB來(lái)源于一支或多支MCB。WCB是直接用于生產(chǎn)的細(xì)胞。生產(chǎn)商有責(zé)任對(duì)每個(gè)細(xì)胞庫(kù)進(jìn)行檢驗(yàn)，以確保其質(zhì)量。

§   生產(chǎn)商應(yīng)說(shuō)明所用建庫(kù)系統(tǒng)的類型、細(xì)胞庫(kù)的大小、所用的容器(瓶子、安頓或其他合適的器皿)和密閉系統(tǒng)，用于制備細(xì)胞庫(kù)的方法包括所用的凍存劑、培養(yǎng)基以及細(xì)胞保存和貯藏的條件。

§   生產(chǎn)商應(yīng)闡明避免微生物污染和避免被實(shí)驗(yàn)室中其他類型細(xì)胞交叉污染的方法，還應(yīng)介紹可追蹤細(xì)胞庫(kù)容器的方法，包括記錄系統(tǒng)，以及能經(jīng)受保存、貯藏和從貯藏中復(fù)蘇時(shí)容器的標(biāo)簽不會(huì)丟失。

生產(chǎn)商應(yīng)說(shuō)明細(xì)胞建庫(kù)的過(guò)程，應(yīng)保證細(xì)胞庫(kù)的均一性，還應(yīng)使細(xì)胞保持一定的生存能力，來(lái)滿足生產(chǎn)及產(chǎn)品一致性的要求。

三、細(xì)胞庫(kù)鑒定和檢測(cè)

細(xì)胞庫(kù)檢測(cè)包括以下內(nèi)容：

1、鑒別試驗(yàn)

應(yīng)采用合適的試驗(yàn)證明建庫(kù)的細(xì)胞就是它本身。鑒別試驗(yàn)可利用細(xì)胞的表型或遺傳型特征，但不必作所有的試驗(yàn)。通常對(duì)MCB作鑒別試驗(yàn)。

對(duì)于人或動(dòng)物細(xì)胞，可采用形態(tài)學(xué)分析與其他試驗(yàn)相結(jié)合的方法。在大多數(shù)情況下，同工酶分析足以確證人或動(dòng)物細(xì)胞庫(kù)的種屬來(lái)源；依據(jù)細(xì)胞系的歷史情況，可采用其他合適的試驗(yàn)。用染色體條帶分析或種屬特異性抗血清的方法可以用于鑒定種族來(lái)源，或者用染色體細(xì)胞遺傳學(xué)來(lái)檢測(cè)獨(dú)te的標(biāo)記染色體，或用DNA分析來(lái)檢測(cè)基因組多態(tài)性(例如STR)。

2、純度檢測(cè)

評(píng)估MCB和WCB的生物學(xué)純度，即游離的外源微生物和外源細(xì)胞污染，是細(xì)胞開(kāi)發(fā)和建庫(kù)的關(guān)鍵部分。在設(shè)計(jì)和進(jìn)行這些試驗(yàn)時(shí)，應(yīng)考慮選擇性試劑和抗生素對(duì)檢測(cè)外源微生物污染的影響，主要檢測(cè)細(xì)菌、真菌、支原體的存在。

對(duì)于細(xì)胞基質(zhì)中可能污染病毒的檢測(cè)，應(yīng)根據(jù)細(xì)胞系的培養(yǎng)史，通過(guò)篩選和相關(guān)的特異性試驗(yàn)，選用可檢測(cè)廣譜病毒的方法。

3、細(xì)胞基質(zhì)的穩(wěn)定性

細(xì)胞鑒定的另一個(gè)目的是考察細(xì)胞在生產(chǎn)中的適用性。細(xì)胞基質(zhì)穩(wěn)定性主要應(yīng)考慮兩個(gè)方面進(jìn)行，即生產(chǎn)產(chǎn)品的一致性和貯存在規(guī)定條件下的細(xì)胞能否維持其生產(chǎn)能力。

評(píng)估培養(yǎng)期間的穩(wěn)定性，至少應(yīng)考察兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)。一個(gè)時(shí)間點(diǎn)是采用最少傳代數(shù)的細(xì)胞，另一個(gè)時(shí)間點(diǎn)是申請(qǐng)上市的生產(chǎn)中達(dá)到或超過(guò)細(xì)胞體外傳代限度的細(xì)胞。細(xì)胞基質(zhì)穩(wěn)定性的驗(yàn)證通常在每個(gè)產(chǎn)品上市申請(qǐng)時(shí)進(jìn)行一次。

4、細(xì)胞核學(xué)和致瘤性試驗(yàn)

根據(jù)細(xì)胞類型、產(chǎn)品的性質(zhì)以及生產(chǎn)工藝，決定是否有必要采用胞核學(xué)和致瘤性試驗(yàn)來(lái)評(píng)價(jià)二倍體細(xì)胞系的安全性或鑒定一個(gè)新的細(xì)胞系。采用廣泛的分析方法測(cè)定非整倍染色體細(xì)胞的相對(duì)豐度未必有用。嚙齒類動(dòng)物細(xì)胞系或已知為非二倍體的新細(xì)胞系不需要作細(xì)胞核學(xué)測(cè)定，因細(xì)胞遺傳學(xué)分析足以評(píng)估細(xì)胞基質(zhì)的特性或純度。對(duì)文獻(xiàn)已記載具有致瘤性的細(xì)胞不需重復(fù)進(jìn)行致瘤性試驗(yàn)。