在組織學(xué)中,石蠟切片和冰凍切片都是常用的方法,前者常用于進行免疫組化實驗,后者則常用于免疫熒光實驗。
組織學(xué)常規(guī)制片技術(shù)中最為廣泛應(yīng)用的切片方法,為石蠟切片與冷凍切片。石蠟切片法包括取材、固定、洗滌和脫水、透明、浸蠟、包埋、切片與粘片、脫蠟、染色、脫水、透明、封片等步驟,為永jiu性顯微玻片標(biāo)本。石蠟切片不僅用于觀察正常細胞組織的形態(tài)結(jié)構(gòu),也是病理學(xué)和法醫(yī)學(xué)等學(xué)科用以研究、觀察及判斷細胞組織的形態(tài)變化的主要方法。多應(yīng)用于手術(shù)中的快速病理診斷。而且也被用于其他許多學(xué)科領(lǐng)域的研究中。
冷凍切片技術(shù),是一種在低溫條件下使組織快速冷凍到一定的硬度,然后進行切片的一種方法。被稱為病理科的急診工作----在外科手術(shù)過程中,醫(yī)生切取部分腫瘤組織或其它病變標(biāo)本,送檢到病理科通過快速冷凍標(biāo)本制作切片,病理科診斷醫(yī)師對該切片進行觀察快速做出判斷得出良、惡性結(jié)果或某種疾病的診斷。
冷凍切片與常規(guī)石蠟切片有什么區(qū)別呢?遠慕簡單介紹一下:
1、制作方式不同:①冷凍切片要求送檢新鮮組織,采用低溫恒冷切片機,將取材組織置于-25℃冷凍箱內(nèi)速凍3-5分鐘,切8微米厚度切片,固定后水洗直接染色,針對不同組織采用不同溫度進行切片。②石蠟切片--送檢組織用10%中性福爾馬林固定,標(biāo)準(zhǔn)取材后,置入全自動脫水機進行脫水、透明、浸蠟,再進行包埋、切片,厚度3-5微米,將切片烤片后,置入全自動染色機進行染色。
2、鏡下觀察不同:①冷凍切片---因為冷凍組織未經(jīng)過固定是新鮮組織冷凍切片,沒有經(jīng)過充分的脫水,對組織的觀察會有一定的影響,所以切片鏡下細胞、組織略顯腫脹,診斷準(zhǔn)確率95%以上。②石蠟切片---因為組織塊經(jīng)過10%中性福爾馬林固定,酒精梯度脫水、二甲苯透明、石蠟包埋,所以切片平整、顏色鮮艷、細胞組織結(jié)構(gòu)清晰可見,診斷準(zhǔn)確率99%以上。
3、用途不同:①冷凍切片用于術(shù)中病理診斷,達到迅速做出診斷,包括良、惡性、切緣及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況。所以要求病理診斷醫(yī)師具有高年資病理診斷經(jīng)驗,取材部位精準(zhǔn), 病理技術(shù)人員具有冰凍切片的經(jīng)驗。②石蠟切片用于術(shù)后病理診斷,要求離體組織及時固定,保持組織原有結(jié)構(gòu)及成分固定在原有位置,經(jīng)過一系列技術(shù)處理,通過這些處理可以使得切片在顯微鏡下清晰的辨認其形態(tài)結(jié)構(gòu),組織細胞形態(tài)結(jié)構(gòu)保存良好,可以幫助醫(yī)生更加準(zhǔn)確的做出診斷。由于冷凍切片存在質(zhì)量和時間上的限制,冷凍切片病理診斷對腫瘤的分型不一定非常準(zhǔn)確,對部分無法確定組織學(xué)類型的病例,還需要等待常規(guī)的石蠟切片予以確診。冷凍切片較石蠟切片制作厚,做出來的切片沒有石蠟切片清晰。
總之,簡單概括起來,兩者之間最大區(qū)別是冰凍切片操作便捷性高,能很好保持抗原活性、脂肪、類脂成分。石蠟切片組織形態(tài)好,能切更大組織,切片厚度薄,連片性好,對標(biāo)本的長期保存非常適合。