斐林試劑和班氏試劑的使用方法及原理不盡相同。斐林試劑和班氏試劑都是檢驗還原性糖的試劑,二者的使用方法及原理、成分也有區(qū)別,下面就從這幾種試劑的使用原理、成分及使用方法等方面做一簡單總結(jié)。
(1)班氏試劑常用于尿糖的鑒定,其配方與斐林試劑不一樣,其配方為:
?、?00mL水中加85g檸檬酸鈉和50g無水tan酸鈉;
?、?0mL加熱的水中加入8.5g無水硫酸銅。制成溶液;
?、郯袰uSO4溶液倒入檸檬酸鈉溶液中,邊加邊攪,如產(chǎn)生沉淀可濾去。
(2)其反應原理與斐林試劑略有差別。利用斐林試劑鑒定時,斐林試劑甲和斐林試劑乙直接反應生成酒石酸絡銅離子。
酒石酸絡銅離子和可溶性還原糖在加熱條件下反應產(chǎn)生磚紅色沉淀。而班氏試劑中的產(chǎn)生卻是這樣的:檸檬酸鈉作為絡合劑,由碳酸鈉提供堿性。CuSO4與檸檬酸鈉溶液和Na2CO3溶液混合時生成檸檬酸絡銅離子,檸檬酸絡銅離子與葡萄糖中的醛基反應生成磚紅色沉淀。
?。?)兩種試劑的保存方式不同。斐林試劑甲和斐林試劑乙混合后會因酒石酸有一定的還原性而自發(fā)地緩慢產(chǎn)生氧化亞銅沉淀,因此斐林試劑一般為現(xiàn)用現(xiàn)配;而班氏試劑的配方中,檸檬酸鈉比較穩(wěn)定,實際堿性也不強,不易還原銅離子產(chǎn)生氧化亞銅沉淀,因此該試劑可長期保存。
當然,無論用班氏試劑還是斐林試劑,歸根結(jié)底都是二價銅與醛基在沸水浴加熱條件下反應而生成磚紅色的沉淀,兩者反應現(xiàn)象一樣,這就是二者的相同之處。