培養(yǎng)基必須含有細(xì)菌生長繁殖所需要的營養(yǎng)物質(zhì)。所用的化學(xué)藥品必須純凈，稱取的份量務(wù)必準(zhǔn)確。酸堿度應(yīng)符合細(xì)菌生長要求。按各種培養(yǎng)基要求準(zhǔn)確測定調(diào)節(jié)pH值。多數(shù)細(xì)菌生長的適宜pH值為7.2～7.6，呈弱堿性。

營養(yǎng)均衡：六大營養(yǎng)物缺一不可。部分生物還有特殊的要求；營養(yǎng)物質(zhì)的配比；酸堿度。

培養(yǎng)基配制時的質(zhì)量控制

容器：配制和分裝培養(yǎng)基的燒瓶，平皿或試管等器材應(yīng)為中性，無酸，堿抑制物殘留，平皿底部要平，以免瓊脂厚薄不一，影響藥敏試驗結(jié)果。

成分來源：各種成分來源可靠，不含對目的菌生長有抑制的物質(zhì)。特殊要o/f試驗），除加入葡萄糖外，不能含o/f試驗的假陽性。培養(yǎng)基配制用水應(yīng)是蒸餾水。

pH值調(diào)整：根據(jù)培養(yǎng)基的不同要求調(diào)整pH 值，控制在要求范圍的±0.2之內(nèi)。應(yīng)當(dāng)注意，培養(yǎng)基在高壓滅菌后其pH 值降低0.1～0.2，故矯正時應(yīng)比實pH值高0.1～0.2。

滅菌：根據(jù)培養(yǎng)基所含成分及配制數(shù)量的不同，選擇不同的滅菌方式，既要達到滅菌效果，又不破壞培養(yǎng)基成分。一般對穩(wěn)定的培養(yǎng)基，如mh瓊脂、營養(yǎng)瓊脂可用高壓滅菌，即121℃15min ；而含糖的培養(yǎng)基則以108℃滅菌為好，以防止糖類破壞。不耐高熱的物質(zhì)如血清、牛乳等，可采用間隙滅菌法滅菌。

分裝：根據(jù)使用的目的和要求決定分裝量。分裝培養(yǎng)基所用的平皿、試管要求清潔，不殘留酸堿；制備平板培養(yǎng)基時，操作臺要水平，以避免瓊脂平板厚薄不一，同時確保無菌操作。

培養(yǎng)基配制后的質(zhì)量控制

培養(yǎng)基外觀情況：包括顏色、透明度、有無沉淀和凝固。如發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基表面有裂紋或與培養(yǎng)皿的邊緣分離，說明培養(yǎng)基有脫水現(xiàn)象，必須丟棄。

無菌試驗：每一批配好的培養(yǎng)基均須進行無菌試驗。先滅菌后分裝的培養(yǎng)基，可采用抽樣方法試驗，少于 100 個樣本通常選取 5%～10%的量，如果配制大量培養(yǎng)基，則任意選取 10 個培養(yǎng)基；無菌分裝培養(yǎng)基則需全部做無菌試驗。樣本在 35 ℃ 或其他適宜的溫度下隔夜培養(yǎng)，如培養(yǎng)基含有血液，則需再置于室溫 1 天，以檢查嗜冷菌。選擇性培養(yǎng)基因含有抑制物質(zhì)，能抑制許多微生物，因此，可加入 10 倍量的無菌液體培養(yǎng)基，稀釋抑制物質(zhì)，以利于檢出污染菌。即使做過無菌試驗，接種時，也要檢查每個平板上的可見菌落。

性能測試：每一批新制或新購的培養(yǎng)基，使用前均須取已知性質(zhì)的庫存菌種進行性能測試。培養(yǎng)基按目的不同可分為增菌培養(yǎng)基、分離培養(yǎng)基和鑒定培養(yǎng)基。

①增菌培養(yǎng)基：接種少量難以生長的細(xì)菌，在一定時間內(nèi)觀察增菌情況，細(xì)菌能生長的最小接種濃度越小，說明增菌培養(yǎng)基性能愈好。

②分離培養(yǎng)基：要求目的菌生長良好，非目的菌被抑制。一般要求生長的目的菌接種量不可過多，較好的方法是將測試菌調(diào)成 0.5 麥?zhǔn)蠞岫鹊木鷳乙?，再?0.001ml 的標(biāo)準(zhǔn)接種環(huán)涂劃在培養(yǎng)基上，觀察菌落生長。

③鑒定培養(yǎng)基：應(yīng)選擇具有典型特征的菌株作性能試驗。如三糖鐵瓊脂，須用弗勞地枸櫞酸桿菌、福氏志賀菌及銅綠假單胞菌 3 種菌分別接種 3 支培養(yǎng)基，若反應(yīng)結(jié)果為斜面產(chǎn)酸/高層產(chǎn)酸、硫化氫陽性，斜面產(chǎn)堿/高層產(chǎn)酸，斜面產(chǎn)堿/高層產(chǎn)堿，質(zhì)量才算合格。