ELISA試劑盒實驗前都要做哪些準(zhǔn)備？
點擊次數(shù)：267 更新時間：2023-01-09
ELISA試劑盒實驗前都要做哪些準(zhǔn)備？
在ELISA實驗中，血清是極為常見的樣本，那么在ELISA實驗過程中處理血清樣本時有哪些注意事項呢？今天就跟大家來介紹一下。
1、要注意避免出現(xiàn)嚴(yán)重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團，其有類似過氧化物的活性，因此，在以HRP為標(biāo)記酶的ELISA測定中，如血清樣本中血紅蛋白濃度較高，則其就很容易在溫育過程中吸附于固相，從而與后面加入的HRP底物反應(yīng)顯色。
2、樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細(xì)菌污染，一則細(xì)菌的生長，其所分泌的一些酶可能會對抗原抗體等蛋白產(chǎn)生分解作用；二則一些細(xì)菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會對用相應(yīng)酶作標(biāo)記的測定方法產(chǎn)生非特異性干擾。
3、血清樣本如是以無菌操作分離，則可以在2～8℃下保存一周，如為有菌操作，則建議冰凍保存。樣本的長時間保存，應(yīng)在-70℃以下。
4、冰凍保存的血清樣本須注意避免因停電等造成的反復(fù)凍融。樣本的反復(fù)凍融所產(chǎn)生的機械剪切力將對標(biāo)本中的蛋白等分子產(chǎn)生破壞作用，從而引起假陰性結(jié)果。此外，凍融樣本的混勻亦應(yīng)注意，不要進行劇烈振蕩，反復(fù)顛倒混勻即可。
5、樣本在保存中如出現(xiàn)細(xì)菌污染所致的混濁或絮狀物時，應(yīng)離心沉淀后取上清檢測。
以上就是ELISA實驗中處理血清樣本的注意事項，處理好實驗樣本是能順利進行實驗的前提，所以大家在一定要多加注意。
