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菌落總數測定菌落計數需注意的事項
點擊次數:663 更新時間:2022-12-20

  (1)如果稀釋度大的平板上菌落數反比稀釋度小的平板上菌落數高,則系檢驗工作中發(fā)生的差錯,屬實驗室事故。此外,也可能因抑菌劑混入樣品中所致,均不可用作檢樣計數報告的依據。


  (2)如果平板上出現鏈狀菌落,菌落之間沒有明顯的界限,這是在瓊脂與檢樣混合時,一個細菌塊被分散所造成。一條鏈作為一個菌落計,如有來源不同的幾條鏈,每條鏈作為一個菌落計,不要把鏈上生長的各個菌落分開來數。此外,如皿內瓊脂凝固后未及時進行培養(yǎng)而遭受昆蟲侵入,在昆蟲爬過的地方也會出現鏈狀菌落,也不應分開來數。


  (3)如果所有平板上都有菌落密布,不要用多不可計作報告,而應在稀釋度最大的平板上,任意數其中2cm2個,除2求出每cm2內平均菌落數乘以皿底面積63.6cm2數,再乘其稀釋倍數作報告。例如10-1~10-3稀釋度的所有平板上均菌落密布,而在lO-3稀釋的平板上任數2個cm2。內的菌落數是60個,皿底直徑為9cm,則該檢樣每g(或m1)中“估計"菌落數為:60/2×63.6×1000=1908000或1.9×106。


  63.6cm2數系按皿底直徑為9cm時計算而得,即:(9/2)2×3.14=63.6;如所用平皿的皿底直徑不是9cm,則可按其直徑的實際cm數代人圓面積公式求出。


  (4)菌落計數中,如能使用菌落計數器,則比較方便,燈光由側面射向平板,菌落易于觀察。由于儀器帶有電子音響訊號,用特制金屬探筆點數中,在發(fā)出音響之下始顯示數字增加,不會發(fā)生差錯。且燈光與平板之間夾有多用方格玻質規(guī)板(方格面積為lcm2),也有助于對菌落密布的平板進行計數。


  (5)檢樣如系微生物類制劑(如酸牛乳、酵母制酸性飲料),則平板計數中應相應地將有關微生物(乳酸桿菌、酵母菌)排除,不可并入檢樣的菌落總數內作報告。一般在校正檢樣的pH7.6后,再進行稀釋和培養(yǎng),此類嗜酸性微生物往往即不易生長。并可用革蘭氏法染色鑒別。染色鑒別時,要用不校正pH的檢樣做成相同稀釋度的稀釋液培養(yǎng)所生成的菌落涂片染色作對照,以資辨別。酵母菌卵圓形,遠比細菌大,大小為2~5×5~30μm,革蘭氏陽性著色。乳酸桿菌在24小時內,于普通營養(yǎng)瓊脂平板上在有氧條件下培養(yǎng),通常是不生長的。


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