血涂片的制備步驟:

（1）采血

靜脈采血后，使用玻璃棒、毛細(xì)管、注射針頭等在距載玻片一端1cm處加1滴抗凝血。

（2）推片

左手平執(zhí)載玻片，或放在類似桌子等平坦地方，右手持推片從前方接近血滴，使血液沿推片邊緣展開(kāi)成適當(dāng)?shù)膶挾?，立即將推片與載玻片呈 30~45°角，輕壓推片邊緣將血液推制成厚薄適宜的血涂片，血涂片應(yīng)呈舌狀，頭、體、尾清晰可見(jiàn)。

（3）干燥

將推好的血涂片在空氣中晃動(dòng)，使其迅速干燥。天氣寒冷或潮濕時(shí)，應(yīng)于37 ℃溫箱中保溫促干，以免細(xì)胞變形縮小。

（4）標(biāo)記

在載玻片的一端用記號(hào)筆編號(hào)。

（5）染色

用特種玻璃鉛筆在血膜兩側(cè)畫(huà)兩條線，防止染液外溢。再將瑞氏染液滴在血膜上，至染液淹沒(méi)全部血膜，染1分鐘。加等量蒸餾水（或緩沖液）與染液混合再染5分鐘。最后用蒸餾水把染液沖掉，用吸水紙吸干，自然干燥后，即可觀察。

血涂片制備注意事項(xiàng):

1、要制備良好的血細(xì)胞涂片，玻片必須干凈。使用玻片時(shí)，只能手持玻片邊緣，切勿觸及玻片表面，以保持玻片清潔、干燥、中性、無(wú)油膩。

2、最好使用非抗凝血制備血涂片，也可用EDTA抗凝血制備。使用抗凝血標(biāo)本時(shí)，應(yīng)充分混勻后再涂片?？鼓獦?biāo)本應(yīng)在采集后4h內(nèi)制備血涂片，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可引起中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞的形態(tài)學(xué)改變。

3、涂片的厚度、長(zhǎng)度與血滴的大小、推片與載玻片之間的角度、推片時(shí)的速度等有關(guān)。一般認(rèn)為血滴大、血粘度高、推片角度大、速度快則血膜厚，反之則血膜薄。

4、血膜應(yīng)厚薄均勻適度，頭尾及兩側(cè)有一定的空隙。如血膜面積太小，可觀察的部分會(huì)受到局限，故應(yīng)以在離開(kāi)載玻片另一端2cm的地方結(jié)束涂抹為宜。一些體積特大的特殊細(xì)胞常在血膜的尾部出現(xiàn)。

5、血涂片必須充分干燥后方可固定染色，否則細(xì)胞尚未牢固地吸附在玻片上，在染色過(guò)程中容易脫落。