如何解凍血清才不會使它的質(zhì)量受損
點擊次數(shù):829 更新時間:2020-01-18
如何解凍血清才不會使它的質(zhì)量受損
血清中含有蛋白質(zhì)、氨基酸、葡萄糖、激素等,其中蛋白質(zhì)主要為白蛋白和球蛋白。氨基酸有多種,是細胞合成蛋白質(zhì)的基本成分,其中有些氨基酸動物細胞本身不能合成,一定要由培養(yǎng)液提供。
血清激素有胰島素、生長激素等及多種生長因子(如表皮生長因子、成纖維細胞生長因子、類胰島素生長因子等);血清還含有多種未知的促細胞生長因子、促貼附因子及其他活性物質(zhì),能促進細胞的生長、增殖和貼附。因此,細胞培養(yǎng)時,要保證細胞能夠順利生長和增殖,一般需添加百分之十到百分之二十的血清,動物血清還可起到酸堿度緩沖液的作用。
如何解凍血清才不會使它的質(zhì)量受損呢?首先將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8C冰箱使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但一定要注意的是,溶解過程中一定要規(guī)則地搖晃均勻以防止沉淀物的產(chǎn)生!小編下面就來詳細介紹下方法和步驟:
避免產(chǎn)生沉淀物的方法:
1、解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。
2、解凍血清時,請按照所建議的逐步解凍法(-2℃至4℃至室溫),若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃,實驗顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。
3、請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害,而影響血清的質(zhì)量。
4、血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。
5、若一定要做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。
血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),該如何處理?欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。但不建議以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會阻塞過濾膜。