胎牛血清采用健康母牛懷孕的八月齡胎牛血液為原料，經(jīng)無菌采集、分離、微孔過濾后而成。本產(chǎn)品無支原體、無牛病毒、無噬毒體、內(nèi)毒素含量低于1EU／ml，適用于細胞、組織器官培養(yǎng)、細胞株保藏、單抗研制，是醫(yī)院、科研院校、動物疫苗、

血清的質(zhì)量要求

隨著科學技術(shù)的發(fā)展和生活水平的不斷提高對生物醫(yī)藥產(chǎn)品的質(zhì)量要求也越來越高，所以對制備工藝中所涉及到的各種原材料的質(zhì)量標準要求也越來越高，特別是對用于細胞培養(yǎng)基中的主要天然成份――牛血清的質(zhì)量要求也不斷提高。牛血清包括胎牛血清、新生牛血清和成牛血清。

一、WHO公布的《用動物細胞體外培養(yǎng)生產(chǎn)生物制品規(guī)程》中的要求：

1. 牛血清必須來自有文件證明無牛海綿狀腦病的牛群或國家。并應具備適當?shù)谋O(jiān)測系統(tǒng)。

2.有些國家還要求牛血清來自未用過反芻動物蛋白飼料的牛群。

3.證明所用牛血清中不含對所生產(chǎn)疫苗病毒的抑制物。

4.血清要通過濾膜過濾除菌，保證無菌。

5.無細菌、霉菌、支原體和病毒的污染，有些國家要求無細菌噬菌體污染。

6.對細胞有良好的支持繁殖作用。

二、我國在對牛血清的質(zhì)量2000年版《中國生物制品主要原輔料質(zhì)控標準》中提出比較嚴格的標準要求。

包括蛋白質(zhì)含量，細菌、真菌、支原體、牛病毒、大腸桿菌噬菌體、細菌內(nèi)毒素，支持細胞增殖檢查。

三、美國對牛血清的質(zhì)量要求：

Gibco 和Sigma二家主要的美國牛血清供應商的牛血清都已進入到我國市場，他們對其質(zhì)量標準要求都極為嚴格，從血清來源到產(chǎn)品質(zhì)量都有明確規(guī)定。

1） 血清來源：可從世界各國收集胎牛血清，但是必須符合他的質(zhì)量標準和美國農(nóng)業(yè)部進口要求。地方當局還不清楚本地是否有牛海綿狀病毒流行的血清不收集，有說明血清質(zhì)量的證明資料：包括收集過程的全部資料、檢驗結(jié)果和交付情況。

2）血清的收集：胎牛血清是心臟穿刺取血，新生牛（10～14天）和小牛（10個月內(nèi)）血清靜脈取血。血清采集條件必須符合工業(yè)生產(chǎn)的標準：低溫下采集、一次分離、分離后立即混合凍存。符合要求的血清56℃水浴30分鐘滅活。

3）血清的制備：

a. 超低IgG胎牛血清：通過親和層析工藝去除胎牛血清中的γ球蛋白，使FBS γ球蛋白含量減到zui低，一般IgG≤5ug/ml，生物學活性不變.

b. 血清透析：用12000～14000分子量的透析膜在0.15M NaCl中透析直到使葡萄糖含量＜0.5mg/ml（用葡萄糖氧化酶／過氧化酶方法測定）。

c. γ－射線照射：已經(jīng)證明γ－射線照射可以有效滅活血清中可能污染的病毒、支原體。照射劑量為30～45KG。而且這個劑量的γ－射線照射不會改變血清的理化性質(zhì)和對細胞培養(yǎng)的影響。

4）除菌過濾:經(jīng)過上述處理的粗制血清再經(jīng)過一系列除菌濾膜過濾包括0.2微米（micron）和0.1微米濾膜。FBS要通過三層0.1微米濾膜，其他血清可通過0.2微米濾膜。

四、終產(chǎn)品血清質(zhì)量

1）化學檢定：滲透壓pH

蛋白含量――電泳法

2） 微生物學檢查：細菌、真菌符合USP標準。

支原體：在支原體專業(yè)培養(yǎng)基上培養(yǎng)了3～4周，培養(yǎng)溫度36℃±2℃

分別在需氧和厭氧條件下進行，有的還需要在支原體瓊脂培養(yǎng)皿上傳4次，Hoechst熒光素DNA染色檢查那些培養(yǎng)法無法檢出的支原體如豬鼻支原體等。

3）內(nèi)毒素檢測

用鱟試劑檢查。

4）細菌噬菌體檢查

主要檢查E.Coli（C300 or K-12）噬菌體。

5）激素含量測定

每批FBS對某些激素含量都要進行測定，包括：雌二醇、胰島素、孕硐、睪wan素、甲狀腺素等。

6）血紅蛋白檢測

血紅蛋白與氧合血紅蛋白的比≥70％，血紅蛋白含量≤mg15/dl。

7）細胞生長效果測定

細胞克隆效果測定，細胞選擇：Sp20/Ag-14 或P3X63-Ag8.653。

五、正確保存

保存血清的方法是什么？ 血清應保存在-5℃至-2O℃。但是，若存放于 4℃時，請勿超過一個月。若您一次無法用完一瓶，建議您無菌分裝血清至恰當?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷凍。反復凍融會對血清的品質(zhì)造成不良影響。