谷氨酰胺一般配置為100倍的濃縮液,即濃度為200mmol/l(29.22g)谷氨酰胺2.922g溶于三蒸水,加至100ml,即配成200mmol/l的溶液。使用時(shí)可向100ml培養(yǎng)液中加入0.5-2ml谷氨酰胺濃縮液,使其終濃度為1-4mmol/l。
關(guān)于配制并分裝100×谷氨酰胺溶液50ml的方法:
1、稱取谷氨酰胺1.4600g,加50ml三蒸水,搖動(dòng),攪拌溶解使固體充分溶解(約需10-20分鐘)
2、吸入干凈,干燥的50ml注射器中(挑選注射器時(shí)要注意針筒和活塞的匹配,不然太緊,吸入和吹出液體都很費(fèi)勁,會(huì)增加很多麻煩),轉(zhuǎn)入無菌間
3、于超凈臺(tái)內(nèi),打開一無菌的100ml血清瓶,無菌操作,取出一濾頭,插在注射器張(配制谷氨酰胺,不得挪作他用),緩緩將濾過的液體注入血清瓶(約需5-10分鐘)
4、取1ml吸管,將谷氨酰胺分裝入無菌試管(或1.5ml的EP管)中(每管1ml,可一次全部分裝完畢(50管),拿出超凈臺(tái),封口膜封口,
5、將分裝好的谷氨酰胺放入-20度冰箱保存,注意不要將試管或EP管放倒,不要讓液體浸到袋子上,hao讓其直立,等溶液*凍結(jié)后,再放倒保存。
6、臨用前,提前30分鐘-1小時(shí)將一管(1ml)谷氨酰胺從冰箱取出放于室溫化凍。