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【肝素-瓊脂糖凝膠 H.P.參數(shù)說明】
中文名:肝素-瓊脂糖凝膠 H.P.
英文名:Heparin Sepharose H.P.
供應(yīng)商:上海遠(yuǎn)慕
規(guī)格:100ml、500ml
保存溫度:4-8℃
操作溫度:4-40℃
分離范圍:70,000-40 ×106
凝膠類型:凝膠過濾填料,凝膠層析介質(zhì)
應(yīng)用:蛋白、大分子復(fù)合物、病毒、核酸、多糖的分離、分子量測定。
【肝素-瓊脂糖凝膠 H.P.】分離技巧_注意事項(xiàng)_性能優(yōu)點(diǎn)_參數(shù)說明
【肝素-瓊脂糖凝膠 H.P.性能優(yōu)點(diǎn)】
1、傳統(tǒng)的偶聯(lián)瓊脂糖介質(zhì),非特異性吸附低,回收率高。
2、分離范圍廣泛。
3、適合分離分子量大小差異大,而對分辨率要求不高的樣本。
【肝素-瓊脂糖凝膠H.P.分離技巧】
1、分離時流速不可太快,切切不可心急,所謂欲速則不達(dá);接餾分時可開全速,節(jié)省時間。
2、柱子盡可能長,瓊脂糖凝膠柱長的增加將極大地改善分離,所不要吝惜填料,寧可將填料全裝在一根大柱子中,不要將填料裝成幾根小柱。所謂集中優(yōu)勢兵力,打擊敵人。
3、 餾分一定要接的細(xì),可1/10,或1/20 個保留體積接成一餾分。
4、洗脫體積一般為2-3個保留體積,對特殊保留強(qiáng)的化合物,可洗脫5個保留體積。
5、鞣質(zhì)成分死吸附嚴(yán)重,如不在乎填料者,可用Sephadex LH20 分鞣質(zhì)
6、瓊脂糖凝膠對黃酮類成分的分離效果,方法很成型,有大量文獻(xiàn)參考。
7、填料反復(fù)使用,每次用完,一般可用甲醇將柱子洗干凈,然后用下一次分離的起步溶劑將甲醇替換出來,待用。暫時不用試可以水洗→含水醇洗(醇的濃度逐步遞增)→醇洗,zui后泡在醇中貯于磨口瓶中備用。如長期不用時,可在以上處理基礎(chǔ)上,減壓抽干,再用少量乙迷洗凈抽干,室溫充分揮散至無醚味后,60~80°C干燥后保存。
【肝素-瓊脂糖凝膠 H.P.注意事項(xiàng)】
1、不同配基的偶聯(lián)方法與上面類似,但是反應(yīng)的條件例如:配基加入量,反應(yīng)時間,反應(yīng)溫度應(yīng)根據(jù)配基的不同進(jìn)行適當(dāng)?shù)恼{(diào)整;
2、可用碳酸鹽、硼酸鹽和磷酸鹽緩沖液做為偶聯(lián)緩沖液,但不能使用含有氨基的Tris、甘氨酸的緩沖液。
3、產(chǎn)品應(yīng)密封貯存在4℃~25℃(保存溶液為20%乙醇),通風(fēng)、干燥、清潔的地方。
4、不能冷凍。
5、用過的柱子貯存在4℃(20%乙醇)。
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