上海遠(yuǎn)慕生物詳細(xì)介紹瓊脂糖凝膠CL-4B的操作步驟,注意事項(xiàng)及其他參數(shù)說(shuō)明,我們現(xiàn)貨為客戶(hù)提供瓊脂糖凝膠CL-2B,瓊脂糖凝膠2B,葡聚糖凝膠 G-200,葡聚糖凝膠 G-100,瓊脂糖凝膠4FF,瓊脂糖凝膠6FF及其他糖凝膠系列,價(jià)格實(shí)惠,如有需要,歡迎訂購(gòu)!
瓊脂糖凝膠CL-4B參數(shù)說(shuō)明:
中文名:瓊脂糖凝膠CL-4B
英文名: Sepharose CL-4B
供應(yīng)商:上海遠(yuǎn)慕
規(guī)格:100ml、500ml
基質(zhì):4%
操作溫度:室溫
顆粒大?。?5-165μm
配基密度:40μmol/mL
每毫升結(jié)合量:15-20mgHSA
瓊脂糖凝膠配基:正丁烷基n-Octyl
性狀:本品為乳白色球狀凝膠,無(wú)嗅、無(wú)味、無(wú)肉眼可見(jiàn)雜質(zhì)
應(yīng)用:蛋白、大分子復(fù)合物、病毒、核酸、多糖的分離、分子量測(cè)定等
適用范圍:限于科研實(shí)驗(yàn),不作臨床
瓊脂糖凝膠CL-4B操作流程
瓊脂糖凝膠CL-4B操作步驟:
1、裝柱凝膠過(guò)濾介質(zhì)的使用對(duì)裝柱的要求較高,為了保證分離效果,一般通過(guò)柱子上加一個(gè)裝柱器來(lái)使分離柱裝滿(mǎn)凝膠,或采用帶有軸向加壓裝置的柱子。凝膠柱床一般高于60cm。裝柱效果可用染料或丙酮-水溶液進(jìn)行檢驗(yàn)。以下過(guò)程為通用介質(zhì)裝填過(guò)程。若為帶有軸向加壓裝置的柱子,可在柱床穩(wěn)定后將柱床壓緊,接好管路。
2、平衡
讓緩沖液以一定流速流過(guò)柱子,到流出液電導(dǎo)和pH不變。
3、上樣
樣品用緩沖液配制,渾濁的樣品要離心和過(guò)濾后上樣。含鹽量過(guò)大、濃度過(guò)小的樣品要先做處理,再上樣。
介質(zhì)對(duì)樣品組分的分離是按組分分子量大小進(jìn)行的,分子量大的先流出來(lái)。
上樣體積約為柱體積的1~2%,越小分離越好。
4、洗脫
用緩沖液洗脫,洗脫中保持流速、緩沖液組成不變。
5、再生
一般用緩沖液洗到平衡,可再次使用。
6、注意
在裝柱、使用和保存柱子的時(shí)候,始終要避免柱子流干氣泡進(jìn)入。
7、去熱源用0.5M的氫氧化鈉清洗柱子5~6小時(shí)或用0.1M的氫氧化鈉24小時(shí)?;蛴靡韵路椒ú襟E去除:
a、2倍柱體積的70%乙醇;
b、2倍柱體積50mMTris-HClpH7.5;
c、1倍柱體積4M尿素;
d、3倍柱體積的Tris緩沖液+0.1MNacl;以上緩沖液都在無(wú)熱源的雙蒸水中配制。
瓊脂糖凝膠CL-4B注意事項(xiàng):
1、不同配基的偶聯(lián)方法與上面類(lèi)似,但是反應(yīng)的條件例如:配基加入量,反應(yīng)時(shí)間,反應(yīng)溫度應(yīng)根據(jù)配基的不同進(jìn)行適當(dāng)?shù)恼{(diào)整;
2、可用碳酸鹽、硼酸鹽和磷酸鹽緩沖液做為偶聯(lián)緩沖液,但不能使用含有氨基的Tris、甘氨酸的緩沖液。
3、產(chǎn)品應(yīng)密封貯存在4℃~25℃(保存溶液為20%乙醇),通風(fēng)、干燥、清潔的地方。
4、不能冷凍。
5、用過(guò)的柱子貯存在4℃(20%乙醇)。
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