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瓊脂糖凝膠CL-4B操作注意事項(xiàng)
點(diǎn)擊次數(shù):1596 更新時(shí)間:2018-03-05

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瓊脂糖凝膠CL-4B參數(shù)說(shuō)明

中文名:瓊脂糖凝膠CL-4B

英文名: Sepharose CL-4B

供應(yīng)商:上海遠(yuǎn)慕

規(guī)格:100ml、500ml

基質(zhì):4%

操作溫度:室溫

顆粒大?。?5-165μm

配基密度:40μmol/mL

每毫升結(jié)合量:15-20mgHSA

瓊脂糖凝膠配基:正丁烷基n-Octyl

性狀:本品為乳白色球狀凝膠,無(wú)嗅、無(wú)味、無(wú)肉眼可見(jiàn)雜質(zhì)

應(yīng)用:蛋白、大分子復(fù)合物、病毒、核酸、多糖的分離、分子量測(cè)定等

適用范圍:限于科研實(shí)驗(yàn),不作臨床

瓊脂糖凝膠CL-4B操作注意事項(xiàng)

瓊脂糖凝膠CL-4B操作流程

瓊脂糖凝膠CL-4B操作步驟

1、裝柱凝膠過(guò)濾介質(zhì)的使用對(duì)裝柱的要求較高,為了保證分離效果,一般通過(guò)柱子上加一個(gè)裝柱器來(lái)使分離柱裝滿(mǎn)凝膠,或采用帶有軸向加壓裝置的柱子。凝膠柱床一般高于60cm。裝柱效果可用染料或丙酮-水溶液進(jìn)行檢驗(yàn)。以下過(guò)程為通用介質(zhì)裝填過(guò)程。若為帶有軸向加壓裝置的柱子,可在柱床穩(wěn)定后將柱床壓緊,接好管路。

2、平衡

讓緩沖液以一定流速流過(guò)柱子,到流出液電導(dǎo)和pH不變。

3、上樣

樣品用緩沖液配制,渾濁的樣品要離心和過(guò)濾后上樣。含鹽量過(guò)大、濃度過(guò)小的樣品要先做處理,再上樣。

介質(zhì)對(duì)樣品組分的分離是按組分分子量大小進(jìn)行的,分子量大的先流出來(lái)。

上樣體積約為柱體積的1~2%,越小分離越好。

4、洗脫

用緩沖液洗脫,洗脫中保持流速、緩沖液組成不變。

5、再生

一般用緩沖液洗到平衡,可再次使用。

6、注意

在裝柱、使用和保存柱子的時(shí)候,始終要避免柱子流干氣泡進(jìn)入。

7、去熱源用0.5M的氫氧化鈉清洗柱子5~6小時(shí)或用0.1M的氫氧化鈉24小時(shí)?;蛴靡韵路椒ú襟E去除:

a、2倍柱體積的70%乙醇;

b、2倍柱體積50mMTris-HClpH7.5;

c、1倍柱體積4M尿素;

d、3倍柱體積的Tris緩沖液+0.1MNacl;以上緩沖液都在無(wú)熱源的雙蒸水中配制。

 

瓊脂糖凝膠CL-4B注意事項(xiàng)

1、不同配基的偶聯(lián)方法與上面類(lèi)似,但是反應(yīng)的條件例如:配基加入量,反應(yīng)時(shí)間,反應(yīng)溫度應(yīng)根據(jù)配基的不同進(jìn)行適當(dāng)?shù)恼{(diào)整;

2、可用碳酸鹽、硼酸鹽和磷酸鹽緩沖液做為偶聯(lián)緩沖液,但不能使用含有氨基的Tris、甘氨酸的緩沖液。

3、產(chǎn)品應(yīng)密封貯存在4℃~25℃(保存溶液為20%乙醇),通風(fēng)、干燥、清潔的地方。

4、不能冷凍。

5、用過(guò)的柱子貯存在4℃(20%乙醇)。

 

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