瓊脂糖凝膠CL-2B是在瓊脂糖凝膠2B的基礎(chǔ)上通過(guò)交聯(lián)使微球的剛性增強(qiáng)，理化性能提高，有利用于工業(yè)生產(chǎn)。該介質(zhì)用于生物大分子的凝膠層析。本品呈白色球狀凝膠，無(wú)嗅、無(wú)味、無(wú)肉眼可見(jiàn)雜質(zhì)。
瓊脂糖凝膠CL-2B參數(shù)說(shuō)明：
中文名：瓊脂糖凝膠CL-2B
英文名：Sepharose CL-2B
供應(yīng)商：上海遠(yuǎn)慕
規(guī)格：100ml,500ml
分離范圍：70,000～40 ×106
應(yīng)用：蛋白、大分子復(fù)合物、病毒、核酸、多糖的分離、分子量測(cè)定
瓊脂糖凝膠CL-2B
瓊脂糖凝膠CL-2B實(shí)驗(yàn)流程：
1、裝柱凝膠過(guò)濾介質(zhì)的使用對(duì)裝柱的要求較高，為了保證分離效果，一般通過(guò)柱子上加一個(gè)裝柱器來(lái)使分離柱裝滿凝膠，或采用帶有軸向加壓裝置的柱子。凝膠柱床一般高于60cm。裝柱效果可用染料或丙酮-水溶液進(jìn)行檢驗(yàn)。以下過(guò)程為通用介質(zhì)裝填過(guò)程。若為帶有軸向加壓裝置的柱子，可在柱床穩(wěn)定后將柱床壓緊，接好管路。
a、讓所有的材料和試劑達(dá)到室溫。配制緩沖液。凝膠層析上樣、平衡和洗脫只用一種低鹽濃度的緩沖液。
b、選擇一根一定直徑的柱子，長(zhǎng)約30~60cm,根據(jù)柱子大小取所需量的凝膠(約為柱床體積的1.15倍)，清洗掉20%乙醇，抽干，用緩沖液(按凝膠：緩沖液=3：1的比例)配成勻漿。
c、將柱內(nèi)及柱子底端用水或緩沖液潤(rùn)濕并保持一小段液位(液面略高于濾膜)，務(wù)必使底端無(wú)氣泡。
d、用玻璃棒引導(dǎo)勻漿沿著柱內(nèi)壁一次性倒入柱內(nèi)，注意勿使產(chǎn)生氣泡。打開柱子出液口，使凝膠在柱內(nèi)自由沉降，連結(jié)好柱子頂端柱頭。
e、打開蠕動(dòng)泵，讓緩沖液用使用時(shí)流速的1.33倍的流速流過(guò)，使柱床穩(wěn)定。用緩沖液平衡柱子，到柱床穩(wěn)定。
f、用一個(gè)裝柱器輔助裝柱。裝完后柱床上端輕輕刮平，上好柱頭。
2、平衡讓緩沖液以一定流速流過(guò)柱子，到流出液電導(dǎo)和pH不變。
3、上樣
a、樣品用緩沖液配制，渾濁的樣品要離心和過(guò)濾后上樣。含鹽量過(guò)大、濃度過(guò)小的樣品要先做處理，再上樣。
b、介質(zhì)對(duì)樣品組分的分離是按組分分子量大小進(jìn)行的，分子量大的先流出來(lái)。
c、上樣體積約為柱體積的1~2%，越小分離越好。
4、洗脫用緩沖液洗脫，洗脫中保持流速、緩沖液組成不變。
5、再生一般用緩沖液洗到平衡，可再次使用。
6、在位清洗
a、對(duì)于以離子鍵結(jié)合上去的蛋白，可以用2MNacl去除。
b、對(duì)沉淀蛋白、對(duì)以疏水性結(jié)合的蛋白或脂類，可用1MNaOH去除。
c、對(duì)強(qiáng)疏水性結(jié)合的蛋白、脂類等，用4~10倍柱體積的70%乙醇或30%異丙醇清洗，但要注意有機(jī)溶劑的濃度以梯度的方式逐漸增加，否則容易產(chǎn)生氣泡。清洗完畢后，用至少3倍緩沖液平衡柱子。
7、注意在裝柱、使用和保存柱子的時(shí)候，要避免柱子流干，氣泡進(jìn)入。
8、去熱源用0.5M的氫氧化鈉清洗柱子5~6小時(shí)或用0.1M的氫氧化鈉24小時(shí)?；蛴靡韵路椒ú襟E去除：a、2倍柱體積的70%乙醇;b、2倍柱體積50mMTris-HClpH7.5;c、1倍柱體積4M尿素;e、3倍柱體積的Tris緩沖液+0.1MNacl;以上緩沖液都在無(wú)熱源的雙蒸水中配制。
9、消毒用0.5~1MNaOH室溫下洗8~10倍柱體積，初始緩沖液平衡柱子。
瓊脂糖凝膠CL-2B注意事項(xiàng)：
1、產(chǎn)品應(yīng)密封貯存在4℃~25℃(保存溶液為20%乙醇)，通風(fēng)、干燥、清潔的地方。
2、不能冷凍。
3、用過(guò)的柱子貯存在4℃(20%乙醇)。
4、本產(chǎn)品避免與氧化劑接觸;避免長(zhǎng)時(shí)間暴露在空氣中。
5、保質(zhì)期：5年。
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