葡聚糖凝膠G-100使用方法，參數(shù)說明，分離技巧等咨訊由上海遠(yuǎn)慕生物詳細(xì)介紹，本司是家專業(yè)從事實(shí)驗(yàn)試劑的商家，現(xiàn)貨供應(yīng)不同系列的糖凝膠系列產(chǎn)品，包含有：葡聚糖凝膠G-200，瓊脂糖凝膠2B，瓊脂糖凝膠6B，葡聚糖凝膠G-50，更多系列請(qǐng)！
葡聚糖凝膠G-100參數(shù)說明：
中文名：葡聚糖凝膠G-100
中文別名：交聯(lián)葡聚糖凝膠 G-100，交聯(lián)右旋糖酐凝膠 G-100
英文名：Sephadex G-100
供應(yīng)商：上海遠(yuǎn)慕
干顆粒直徑： 40～120 μm
分子量分級(jí)范圍：A.肽及球形蛋白質(zhì)：4000～150000；B. 葡聚糖(線性分子)：1000～100000
床體積毫升/克干分子篩：12～15ml/g
PH：2～13
應(yīng)用：利用分子篩作用；進(jìn)行多肽分離，脫鹽，清洗生物提取液，分子量測(cè)定
性狀：白色微球，多孔
凝膠類型：凝膠過濾填料，親水型凝膠
結(jié)構(gòu)成分：交聯(lián)右旋糖酐
保存：4-25℃
葡聚糖凝膠G-100使用方法
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1、葡聚糖凝膠預(yù)處理：在室溫下，將葡聚糖凝膠干粉浸泡于蒸餾水中至少24小時(shí)，并不斷攪拌以保證凝膠溶脹，或者用蒸餾水煮沸至少1小時(shí)直至充分溶脹，凝膠體積不再變化。
注：在溶脹前，加入蒸餾水?dāng)嚢韬笫蛊渥匀怀两?，沉降后若上層溶液中漂浮的凝膠碎片顆粒較多，需要重復(fù)多次漂洗將其除去，防止層析時(shí)阻塞凝膠柱，影響流速。
2、裝柱：將溶脹好的凝膠根據(jù)裝柱要求一次性置入柱內(nèi)，注意保持濕態(tài)裝柱，并避免柱內(nèi)產(chǎn)生氣泡或斷層；裝柱要均勻，可在凝膠耐受的操作壓下裝柱，裝好的凝膠柱可以檢測(cè)柱效，檢測(cè)過濾柱裝填是否合格。
凝膠層析分離度取決于柱高，為分離不同組分，凝膠柱床必須有適宜的高度：分級(jí)分離時(shí)，一般需要 100cm 左右長(zhǎng)的層析柱，柱高與直徑之比為 20:1-100:1，柱高過高時(shí)，凝膠擠壓變形阻塞會(huì)引起較大的反壓，應(yīng)當(dāng)盡可能避免；分組分離(例如脫鹽)時(shí)用短柱，柱高控制在40-50cm 以下，柱高與直徑的比約為 5:1-10:1。
3、平衡：上樣前用平衡液平衡層析柱至少3-5個(gè)柱體積直到記錄儀基線變得平穩(wěn)為止(例如流出液的PH值等于上柱的Buffer的PH值)。
4、上樣：分級(jí)分離時(shí)上樣量一般為5%的柱床體積，我們建議初次上樣控制在1-2%的床體積，視分離情況可以調(diào)整，脫鹽時(shí)上樣量可以達(dá)到20%的柱床體積；樣品溶液如有雜質(zhì)或沉淀應(yīng)過濾或離心除去，樣品的粘度不能過高，否則影響分離效果。
5、洗脫方法:可以用無(wú)鹽水，也可以采用上柱時(shí)的緩沖液洗脫；在上柱緩沖液中加入NaCl等梯度洗脫或鹽梯度洗脫也可以*分離純化。
6、在位清洗(CIP)：凝膠使用十次后作一次CIP，目的是去除柱床內(nèi)沉淀的及頑固殘留的蛋白；方法是以40cm/h用1M氫氧hua鈉反向清洗四個(gè)柱體積，再以至少三個(gè)柱體積平衡緩沖液再生。
7、保存：凝膠柱暫時(shí)不用，可將其回收，一般方法是將凝膠用水沖洗干凈濾干，可加入0.02%疊氮hua鈉防腐或用20%乙醇浸泡，以控制微生物生長(zhǎng)。
葡聚糖凝膠G-100分離技巧:
1、分離時(shí)流速不可太快，切切不可心急，所謂欲速則不達(dá)；接餾分時(shí)可開全速，節(jié)省時(shí)間。
2、柱子盡可能長(zhǎng)，葡聚糖凝膠柱長(zhǎng)的增加將極大地改善分離，所不要吝惜填料，寧可將填料全裝在一根大柱子中，不要將填料裝成幾根小柱.
3、餾分一定要接的細(xì)，可1/10，或1/20個(gè)保留體積接成一餾分。
4、洗脫體積一般為2-3個(gè)保留體積，對(duì)特殊保留強(qiáng)的化合物，可洗脫5個(gè)保留體積。
5、鞣質(zhì)成分死吸附嚴(yán)重，如不在乎填料者，可用SephadexLH20分鞣質(zhì).
6、葡聚糖凝膠對(duì)黃酮類成分的分離效果，方法很成型，有大量文獻(xiàn)參考。
7、填料反復(fù)使用，每次用完，一般可用甲醇將柱子洗干凈，然后用下一次分離的起步溶劑將甲醇替換出來(lái)，待用；暫時(shí)不用試可以水洗→含水醇洗(醇的濃度逐步遞增)→醇洗，zui后泡在醇中貯于磨口瓶中備用；如長(zhǎng)期不用時(shí)，可在以上處理基礎(chǔ)上，減壓抽干，再用少量乙迷洗凈抽干，室溫充分揮散至無(wú)醚味后，60～80°C干燥后保存。
葡聚糖凝膠G-100性狀說明：
色珠?；蚍勰瑢儆H水性凝膠！性穩(wěn)定，不溶于水，弱酸和堿溶液，遇強(qiáng)酸糖甘鍵分解用于凝膠過濾，在強(qiáng)酸中凝膠骨架的糖甘鍵被水解。
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