上海遠(yuǎn)慕生物詳細(xì)為您介紹腺苷脫氨酶(ADA)檢測試劑盒(波氏比色法)檢測原理,操作步驟,注意事項(xiàng)及其他咨訊,本司所售的檢測試劑盒品種有很多,比如:淀粉酶(AMS)檢測試劑盒(碘-淀粉比色法),單胺氧化酶(MAO)檢測試劑盒(醛苯腙比色法),脂肪酶(LPS)檢測試劑盒(比濁微板法),更多檢測試劑盒請!
中文名:腺苷脫氨酶(ADA)檢測試劑盒(波氏比色法)
供應(yīng)商:上海遠(yuǎn)慕
規(guī)格:100T
分類:酶類檢測
保存:4℃,避光,6個月
用途:定量檢測血清、血漿、組織等樣品中的腺苷脫氨酶活性
說明:腺苷脫氨酶催化腺嘌呤核苷水解脫氫,產(chǎn)生銨離子;通過分光光度計(jì)檢測640nm處吸光度。
腺苷脫氨酶(ADA)檢測試劑盒(波氏比色法)
腺苷脫氨酶(ADA)檢測試劑盒(波氏比色法)檢測原理:
待測樣品中的ADA催化腺嘌呤核苷水解脫氨,產(chǎn)生次huang嘌呤核苷和銨離子,利用波氏顯色法,測定氨離子生成量;其反應(yīng)公式為:腺苷+H2O→次huang嘌呤+NH3;通過分光光度計(jì)檢測處吸光度,根據(jù)計(jì)算公式可得ADA活力,100T試劑盒可測50個樣本;該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域,不宜用于臨床診斷或其他用途。
腺苷脫氨酶(ADA)檢測試劑盒(波氏比色法)操作步驟:
1、準(zhǔn)備樣品:
a、血漿,血清樣品:血漿,血清按照常規(guī)方法制備;可以直接用于本試劑盒的測定,凍存,用于ADA的檢測。
b、細(xì)胞或組織樣品:取恰當(dāng)細(xì)胞或組織進(jìn)行勻漿,低速離心取上清,凍存,用于ADA的檢測。
c、高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的ADA,可以使用ddH2O稀釋。
d、(選做)樣品準(zhǔn)備完畢后可以用BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度,以便于后續(xù)計(jì)算單位蛋白重量組織或細(xì)胞內(nèi)的ADA含量。
2、稀釋標(biāo)準(zhǔn)品:用ddH2O準(zhǔn)確稀釋氨氮標(biāo)準(zhǔn)(1mg/ml)至25μg/ml,即為氨氮標(biāo)準(zhǔn)工作液,4℃保存,備用。
3、ADA檢測:設(shè)置空白管,標(biāo)準(zhǔn)管,對照管,測定管,溶液應(yīng)按照順序依次加入,并注意避免產(chǎn)生氣泡;如果樣品中的酶活性過高,可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測定。
4、混勻,分光光度計(jì)處檢測吸光度值,比色杯光徑,以ddH2O調(diào)零,讀取各管吸光度值;一般應(yīng)數(shù)小時內(nèi)檢測完畢;酶活力高于上限者,應(yīng)將樣品稀釋后重新測定,結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。
腺苷脫氨酶(ADA)檢測試劑盒(波氏比色法)注意事項(xiàng):
1、稀釋樣品和研磨樣品所用水,均應(yīng)為ddH2O,不可為普通的水。
2、如果采用單位,需在測得活力單位基礎(chǔ)上乘以1.19。
3、胸水標(biāo)本經(jīng)離心后取上清,置于4℃保存?zhèn)溆茫珹DA活性可穩(wěn)定1周。
4、血清樣本應(yīng)避免溶血,4℃保存3天。
5、為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
說明:
腺苷脫氨酶(Adenosine Deaminase,ADA)是嘌呤核苷代謝中重要的酶類,屬于一種巰基酶,每分子至少含2個活性巰基;ADA能催化腺嘌呤核苷轉(zhuǎn)變?yōu)榇蝖uang嘌呤核苷,再經(jīng)核苷磷酸化酶作用生成次huang嘌呤,其代謝緩和終產(chǎn)物為尿酸;ADA廣泛分布于人體各組織中,以胸腺,脾和其他淋巴組織中含量zui高;而肝,肺,腎和骨胳肌等含量低。
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標(biāo)簽:腺苷脫氨酶(ADA)檢測試劑盒(波氏比色法)